遗传修饰动物基因型检测

检测周期

检测周期2-3个工作日。

实验步骤

（1）小鼠组织取材

        无菌收取小鼠尾尖组织，如图1所示。

图1 小鼠尾尖组织取材

（2）小鼠DNA提取

         将鼠尾置于盛有220μl裂解液的EP管中，56℃孵育过夜。次日，采用膜吸附法从供试品中提取基因组DNA。使用TE将基因组DNA稀释至50 ~ 400 ng/ μl， 作为PCR扩增模板，-20℃保存备用。

（3）特异性片段扩增

         采用两对特异性引物，对鼠尾基因组DNA进行扩增。野生型小鼠DNA作为阴性对照，无菌水作为空白对照。

（4）梯度凝胶电泳

         采用1.5%琼脂糖凝胶，150V，25 min，对扩增片段进行电泳，两对引物均能扩增出特异性扩增片段的样品判定为阳性。

（5）图像采集

         梯度凝胶电泳后，转至凝胶成像系统采集图像。如图2所示。

图2 PCR结果

M：D2000 Marker；野生型:  560 bp；纯合子：415 bp；杂合子：415 ＆ 560 bp

（6）数据分析和报告整理

        根据图像采集结果分析检测结果，整理出检测报告，如图3所示。

图3 检测报告

补充说明

1、需客户提供引物或引物序列（由我司代为合成）

2、检测结束后我们将提供剩余的DNA样品及引物

3、提供一份检测报告及原始条带的荧光或灰度图

4、组织特异性敲除小鼠，将针对其特异性病理变化进行检测。